1. 消毒员必须严格执行操作规程。
2. 灭菌前物品的准备与包装：需灭菌的物品必须彻底清洗干净，注意不能用生理盐水清洗，灭菌物品上不能有水滴或水分太多，以免造成环氧乙烷稀释和水解。环氧乙烷几乎可用于所有医疗用品的灭菌。适合于环氧乙烷灭菌的包装材料有纸、复合透析纸、布、无纺布、通气型硬质容器等。灭菌物品装载：灭菌柜内装载物品上下左右均应有空隙（灭菌物品不能接触柜壁），物品装载量不应超过柜内总体积的80%。
3. 专人负责环氧乙烷灭菌器的操作、保养，定期检查各管道是否漏气。
4. 灭菌周期结束取物时应戴口罩、防护手套，并采用人在前、物在后方式移动物品。
5. 打开环氧乙烷钢瓶阀门时应缓慢，钢瓶出口不可朝向面部；皮肤、黏膜、眼睛不慎溅上环氧乙烷时，应立即用水冲洗，防止灼伤。
6. 在使用及维修灭菌器过程中，应防止工作人员中毒，如出现头晕、恶心、呕吐等症状时，应立即离开现场，在通风良好处休息，症状严重者应及时就医。
7. 环氧乙烷灭菌器在解析过程中排出的环氧乙烷气体，应经专用排气管道系统排出，并按照有关部门对排放系统的相关管理规定执行。
8. 环氧乙烷储气罐应存放在通风、防晒温度≤40℃的环境内，但不能将其放在冰箱内。
9. 环氧乙烷储气钢瓶的瓶口必须旋紧，钢瓶禁止横放，搬运时轻拿轻放。
10. 注意事项：
（1）应安放在通风良好的地方，切勿放置于接近火源的地方。应安装专门的排气管道，且与大楼其他管道完全隔离。
（2） 保证环氧乙烷灭菌器及气瓶或气罐远离火源和静电。环氧乙烷存放处，应无火源，无转动之马达，无日晒，通风好，温度低于40℃，但不能放在冰箱内。严格按照国家制定的有关易燃易爆物品储存要求进行处理。
（3） 投药及开瓶时不能用力过猛，以免药液喷出。
（4） 每年对环氧乙烷工作环境进行空气浓度的监测。
（5） 过度接触环氧乙烷后，迅速将患者移离中毒现场，立即吸入新鲜空气；皮肤接触后，用水冲洗接触处至少15分钟，同时脱去脏衣服；眼接触液态环氧乙烷或高浓度环氧乙烷气体至少冲洗眼10分钟，遇前述情况均应尽快就诊。
11. 环氧乙烷灭菌效果监测：a) 物理监测：每次灭菌应连续监测并记录灭菌时的温度、压力、灭菌剂的浓度和时间等灭菌参数。 b) 化学监测：每个灭菌物品包外应使用包外化学指示胶带，作为灭菌过程的标志；包内放置化学指示卡。当化学指示物变色不符合要求时，产品不应放行和使用。当出现三个以上包内指示物变色不合格时，同一批次的灭菌物品不应放行。
12. 灭菌室内严禁明火作业，并有通风设施和消防器材。